(Utworzył nową stronę „==Immunoprecypitacja== Technika biologii molekularnej pozwalająca na wyodrębnienie określonego białka komórkowego i ocenę jego interakcji z innymi białkami lu...”) |
(Brak różnic)
|
Wersja z 12:04, 11 paź 2012
Immunoprecypitacja
Technika biologii molekularnej pozwalająca na wyodrębnienie określonego białka komórkowego i ocenę jego interakcji z innymi białkami lub kwasami nukleinowymi. W technice immunoprecypitacji z lizatu komórkowego lub tkankowego, z wykorzystaniem swoistych przeciwciał, „wyławia” się poszukiwane białko. Następnie powstałe kompleksy Ab-białko są strącane z użyciem ziaren L-agarozy opłaszczonych białkiem A lub G pochodzącym z bakterii Staphylococcus aureus, które po odwirowaniu łatwo odizolować od lizatu. W kolejnym etapie kompleksy ziaren agarozy z analizowanym białkiem i swoistym przeciwciałem poddaje się denaturacji i rozdziela techniką Western blot. Wykorzystując immunoblotting można zweryfikować obecność strącanego białka a także wykrywać białka, które były z nim połączone w komórce. Schematyczna ilustracja techniki immunoprecypitacji jest przedstawiona na rysunku 1.
Literatura